Ово је врста ензима који катализује (убрзава) реакције тамо где се врше трансфери фосфатних група, конкретно хексокиназа делује на фосфорилацију глукозе да би створила ново једињење звано „глукоза-6-фосфат“ (фосфорна група се налази на угљенику број 6 глукозе). У биохемијској реакцији да је потребно деловање хексокиназе, то је процес гликолизе, односно разградње глукозе, посебно у мишићима и другим ткивима као што су мозак, црвена крвна зрнца и, између осталог, разградња глукозе резултира производњом пирувичне киселине или пируват; реакција гликолизе обрнуто, резултира стварањем глукозе из некарбонских једињења или глукогенеогенеза и јавља се на нивоу јетре.
Сада се овај ензим тада називао хексокиназа због етимолошког значења речи, „киназа“ указује на то да ензим производи фосфорилацију (додаје фосфорну групу у реакцију), а „хексо“ се односи на реакцију која је дати у хексозама, то су група угљених хидрата или шећера који се састоје од 6 угљеника, унутар ове групе су глукоза, фруктоза, маноза, између осталих. Једно од основних хемијских једињења за правилно функционисање хексокиназе је магнезијум, који инхибира негативне набоје кисеоника или АТП, олакшавајући тако комбинацију фосфатне групе са хексозом, из тог разлога не делује без присуства магнезијума.
Хексокиназа има изоензим (различити су, али испуњавају исту функцију) ово се назива глукокиназа, разлика између њих је место локализације, хексокиназа се налази у свим ћелијским ткивима којима је глукоза потребна као извор енергије, док да се глукокиназа налази само унутар хепатоцита, то су ћелије које чине оно што је ткиво јетре(јетра). Оба испуњавају исту функцију, фосфорилирају глукозу тако да не излази из ћелије, заробљавајући је да изврши процес гликолизе, друга важна разлика између оба ензима је једињење које инхибира његову функцију, хексокиназа престаје да делује ако је поседује глукоза-6-фосфат у високим концентрацијама, док су глукокиназе инхибиране великим количинама фруктоза-6-фосфата.
